Laboratorijska vaja je pripravljena tako, da udeleženci lahko sami izvedejo poskus elektrofuzije celic z metodo usedanja. Celice obarvane s fluorescentnima barviloma CMRA in CMFDA nasadijo na ploščico in jim dovolijo, da se usedejo in rahlo pritrdijo na podlago. Takrat celice izpostavijo hipoozmoloarnemu pufru in po ustreznem času dovedejo električne pulze. Rezultate ovrednotijo na fluorescentnem mikroskopu.
F.18 Posredovanje novih znanj neposrednim uporabnikom (seminarji, forumi, konference)
COBISS.SI-ID: 7425108V patentni prijavi smo zaščitili koničasto komoro z vgrajenimi elektrodami. Komora predstavlja pomemben napredek pri izvedbi postopka elektroporacije, elektrofuzije in elektrotransfekcije, saj omogoča permeabilizacijo celic v homogenem električnem polju, pri čemer je potrebne bistveno manj manipulacije celic.
F.33 Patent v Sloveniji
COBISS.SI-ID: 6613076Na omenjeni konferenci je bila prvič opisana modifikacija elektrozlivanja celic, ki se pritrdijo na podlago. Namesto konfluentne celične kulture uporabimo celice, ki so se le rahlo pritrdile podlage in pri tem ohranile sferično obliko. Opisana metoda za doseganje stika med celicami je bila predstavljena na dveh celičnih linijah. Rezultati so pokazali da sta delež zlitih celic in preživetje celic po elektroporaciji odvisna od uporabljene celične linije. Deleži zlitih celic, ki smo jih dosegli z novo metodo, so primerljivi z do sedaj objavljenimi raziskavami.
B.03 Referat na mednarodni znanstveni konferenci
COBISS.SI-ID: 7081812Komoro z integriranimi elektrodami, ki smo je razvili v našem laboratoriju smo testirali za elektroporacijo in elektrotransfekcijo celic CHO. V tem delu smo pokazali, da je komora z integriranimi elektrodami primerna za elektroporacijo celic v suspenziji in transfekcijo celic. Uporabili smo električne pulze v različnih smereh, ki so uspešnejši za elektroporacijo celic kot enosmerni.
B.03 Referat na mednarodni znanstveni konferenci
COBISS.SI-ID: 7081556Ugotovili smo, da se različne celične linije razlikujejo po svoji občutljivosti na inkubacijo v hipotoničnih pogojih. Zato moramo dinamiko nabrekanja v hipotoničnem pufru določiti za vsako celično linijo posebej. Povečan volumen celic v hipotoničnem pufru, ki je zaradi elektroporacije dolgotrajnejši, lahko prispeva k izboljšanju učinkovitosti elektrofuzije. Viabilnost celic se po inkubaciji v hipotoničnem pufru ni zmanjšala. Pri izbiri parametrov elektroporacije v hipotoničnem pufru moramo upoštevati tudi povečanje celic.
B.03 Referat na mednarodni znanstveni konferenci
COBISS.SI-ID: 6436692