Učinek intrabronhialnega zdravljenja z zunajceličnimi vezikli, pridobljenimi iz matičnih celic adipoznega tkiva, na pljučno vnetje in miRNA v krvi in bronhoalveolarni tekočini pri konjih s hudo astmo.

Huda oblika astme (Severe equine asthma, SEA), je pogosto obolenje pri konjih. Bistvene lastnosti bolezni so povečana preobčutljivost in odzivnost dihal na alergene v vdihanem zraku, ter posledičen razvoj kroničnega nevtrofilnega vnetja dihalnih poti, bronhokonstrikcije in kopičenja sluzi. Kvaliteta življenja in predvsem fizična sposobnost prizadetih konj sta okrnjeni, bolezen pa predstavlja tudi velik logističen in finančni zalogaj za lastnike. Patogeneza obolenja je podobna pri astmatičnih ljudeh, zato je konj primeren model za preučevanje človeške astme. Raznolikost fenotipov in sub-fenotipov astme pri obeh vrstah je pomanjkljivo raziskana, kar omejuje razvoj in uporabo ciljnih terapij. Tradicionalno zdravljenje SEA vključuje zmanjšanje izpostavljenosti alergenom in zdravljenje z lokalnimi ali sistemskimi protivnetnimi zdravili in bronhodilatatorji. Zelo pogosto se uporabljajo tudi antibiotiki. Te terapevtske strategije le lajšajo simptome in ne obravnavajo preoblikovanja sten dihalnih poti. Zdravljenje s sistemskimi kortikosteroidi je lahko povezano tudi z neželenimi stranskimi učinki, medtem ko zdravljenje z antibiotiki, ki se na splošno smatra kot nepotrebno pri tem obolenju, spodbuja selekcijo bakterij odpornih na antibiotike. Dovajanje zdravil preko inhalacije (kortikosteroidi in bronhodilatatorji), ki kaže manj stranskih učinkov, je trenutno najbolj učinkovito zdravljenje za nadzor simptomov SEA. Vendar, ne glede na obliko zdravljenja, simptomi SEA vztrajajo pri več kot eni tretjini astmatičnih konjih. V veterinarski in humani medicini se regenerativna celična terapija uveljavlja kot oblika zdravljenja za številna kronična obolenja. Nedavno smo pokazali, da je zdravljenje z mezenhimskimi matičnimi celicami (MSC) varno in, da lahko ugodno vpliva na vnetje pri SEA. Pri patogenezi vnetja pri astmi pa imajo osrednjo vlogo tudi mikro RNA (miRNA). Vpliv miRNA je lahko pozitiven in/ali negativen, lokalen ali splošen, zato je zelo pomembno spoznati vpliv posameznih miRNA na specifična patološka stanja. Naše preliminarne raziskave so v bronhoalveolarni tekočini (BALf) konj s SEA identificirale številne miRNA, ki so povezane s patogenezo astme pri konjih in ljudeh, kot tudi miRNA, za katere trenutno niso poznane povezave s pljučnimi obstruktivnimi obolenji. Dinamika prenosa miRNA je močno izboljšana s prenosom miRNA preko zunajceličnih veziklov (EV), kar optimizira medcelično komunikacijo med endotelijskimi celicami, epitelijskimi celicami, dendritičnimi celicami in MSC. Prenos bioloških molekul z EV spremeni biološko aktivnost celic prejemnika in tako vpliva na vnetje v pljučih. Ta študija bo sledila vpeljanemu raziskovalnemu modelu, ki smo ga predhodno že uporabili v obliki randomizirane kontrolirane raziskave. Konji s potrjeno diagnozo SEA bodo naključno razdeljeni v dve skupini. Ena skupina se bo zdravila z intrabronhialno aplikacijo avtolognih MSC, pridobljenih iz maščobnega tkiva (AD-MSC), druga pa z EV, pridobljenimi iz AD-MSC. BALf in periferno vensko kri bomo odvzeli vsem konjem pred in tri tedne po zdravljenju. Evidentiral se bo kliničen potek obolenja, laboratorijsko pa se bodo izmerile ravni mRNA interlevkinov in njihovih beljakovin. miRNA bo analizirana v vseh vzorcih, vključno z vzorci MSC in EV pred aplikacijo, z visoko zmogljivo metodo sekvencioniranja. Rezultati te študije bodo večplastni. Identificirano miRNA bomo skušali povezati s specifičnimi fenotipi/sub-fenotipi astme. Dokumentirali bomo odnos med miRNA in vnetnimi citokini pred in po zdravljenju v krvi in v BALf. Na podlagi naših predhodnih raziskav predvidevamo, da bo zdravljenje z EV imelo pozitiven učinek na vnetje v dihalih pri SEA. EV lahko predstavljajo bolj specifično in stabilno obliko zdravljenja v primerjavi z MSC. Lahko se dovajajo lokalno tudi v obliki inhalacije/pršilnikov, kar bi bil naslednji korak pri oblikovanju specifičnih terapij za posamezne fenotipe astme.