Zunajcelični vezikli kot biološki označevalci zavrnitve presajene ledvice

Presaditev ledvice je najboljši način zdravljenja bolnikov s končno ledvično odpovedjo. Zavrnitev presadka predstavlja glavni vzrok prezgodnje odpovedi njegovega delovanja. Incidenca akutne zavrnitve v prvem letu po presaditvi ledvice umrlega darovalca je v Sloveniji 13 % in je primerljiva z razvitimi centri. 10-letna stopnja odpovedi presadka je 30 %. Delovanje in preživetje presajene ledvice sta odvisna od zgodnjega odkritja (subklinične) zavrnitve, fenotipa zavrnitve ter pravočasnega imunosupresivnega zdravljenja. Obstajata dva glavna fenotipa zavrnitve: zavrnitev, posredovana z limfociti T (angl. T-cell mediated rejection, TCMR) in zavrnitev, posredovana s protitelesi (angl. antibody-mediated rejection, ABMR). TCMR in ABMR povzročajo različni imunski procesi, zato je zdravljenje različno. Neinvazivni biološki označevalci, ki se uporabljajo pri rednem kliničnem spremljanju bolnikov s presajeno ledvico (serumski kreatinin, ocena glomerulne filtracije in proteinurija), ne morejo odkriti subklinične zavrnitve, niti razlikovati med TCMR in ABMR. Standard v diagnostiki okvare presadka je ledvična biopsija. Ker je biopsija invaziven poseg, ni združljiv z rutinskim spremljanjem delovanja presadka. Zato so za dolgoročno izboljšanje rezultatov presaditve ledvice potrebni novi neinvazivni biološki označevalci, ki bodo omogočali pogosto spremljanje in pravočasno odkrivanje subklinične zavrnitve. Zunajcelični vezikli (ZV) predstavljajo obetaven nov analit tekočih biopsij. ZV so heterogena skupina s fosfolipidnim dvoslojem zaprtih nanodelcev, ki jih izločajo vse celice in se kopičijo v telesnih tekočinah. Njihova molekularna sestava, koncentracija in velikost odražajo njihovo izvorno celico in njeno (bolezensko) stanje. ZV v krvi in urinu so nov, a še premalo raziskan vir neinvazivnih bioloških označevalcev, pri čemer naši preliminarni podatki nakazujejo, da je na ZV vezana DNK (zvDNK) obetaven kandidat za nove biološke označevalce zavrnitve presadka. Vodilni cilj projekta je identifikacija neinvazivnih bioloških označevalcev zavrnitve presajene ledvice, temelječih na ZV ali zvDNK, ki bi omogočili zgodnje odkrivanje zavrnitve in fenotipa zavrnitve. V ta namen bomo v ločenih delovnih sklopih obravnavali naslednjih pet ciljev: (i) zgraditi zbirko bioloških vzorcev in kliničnih podatkov bolnikov s presajeno ledvico (WP1), (ii) dokazati, da urinski in plazemski ZV ter zvDNK odražajo histopatološko diagnozo zavrnitve presajene ledvice (WP2), (iii), dokazati, da so urinski in plazemski ZV ter zvDNK zgodnji pokazatelji subklinične zavrnitve presajene ledvice (WP3), (iv), dokazati, da z imunskim odzivom povezan proteinski tovor urinskih in plazemskih ZV odraža fenotip TCMR ali ABMR (WP4) in (v) poročati o rezultatih projekta (WP5). Domnevamo, da sta urinska in plazemska zvDNK komplementarna označevalca zavrnitve, ki, skupaj s proteinskim tovorom ZV, povezanim z aloimunskimi procesi, omogočata ločevanje med fenotipom TCMR in ABMR in prilagoditev imunosupresivnega zdravljenja, kar lahko podaljša preživetje presadka. Projekt bomo izvajali raziskovalci vodilnih slovenskih inštitucij na področju medicinskih raziskav z dopolnjujočim strokovnim znanjem s področja presaditve ledvice, ZV kot bioloških označevalcev in kvantifikacije DNK. Preteklo uspešno sodelovanje dokazujejo skupni raziskovalni projekti, objave, doktorske naloge ter ozaveščanje javnosti. Projekt je prva raziskava, ki bo sočasno sistematično ocenjevala ZV in zvDNK iz urina in krvi kot vir neinvazivnih bioloških označevalcev za odkrivanje zavrnitve presajene ledvice ter fenotipa zavrnitve. V ta namen bomo uporabili najsodobnejše tehnike analize ZV in zvDNK. Pomembno je, da bi lahko rezultati projekta privedli do inovativnega pristopa k neinvazivnemu kliničnemu spremljanju presajene ledvice in pravočasne prilagoditve imunosupresivnega zdravljenja, kar bi lahko pomembno pripomoglo k podaljšanju preživetja presadka, zvečalo kakovost življenja bolnikov in zmanjšalo stroške zdravljenja.