Vzpostavitev in karakterizacija nove humane stromalne celične linije peritonealne endometrioze

Endometrioza je ženska ginekološka bolezen, opredeljena s prisotnostjo endometriotičnega tkiva zunaj maternične votline. Ta zapletena, od estrogenov odvisna vnetna bolezen prizadene približno 190 milijonov žensk po vsem svetu. Kljub veliki razširjenosti endometrioze so raziskave te bolezni še vedno premalo financirane, problemi neznane etiologije, zapoznele diagnoze in pomanjkanja ustreznega zdravljenja pa ostajajo nerešeni. Za boljše razumevanje patofiziologije endometrioze ter odkrivanje novih možnosti diagnosticiranja in zdravljenja te izčrpavajoče bolezni so potrebni novi eksperimentalni modeli endometrioze. Tipična endometriotična lezija je histološko opredeljena s prisotnostjo epitelijskih žlez in endometriju podobne strome. Ker imajo primarne endometriotične celice omejeno življenjsko dobo, je bilo doslej ustvarjenih več nesmrtnih celičnih linij. Vendar so trenutno razpoložljive endometriotične celične linije pretežno epitelijske, ki izvirajo iz endometriomov jajčnikov. Ta predlog projekta je osredotočen na vzpostavitev in karakterizacijo nove stromalne celične linije peritonealne endometrioze. Da bi to dosegli, bomo optimizirali izolacijo in gojenje endometriotičnih primarnih celic. Po izolaciji bomo čistost primarnih celičnih kultur določili z uporabo celično-specifičnih markerjev. Za ustvarjanje imortalizirane stromalne celične linije bomo uporabili plazmid človeške telomerazne reverzne transkriptaze (hTERT). Ocenili bomo naslednje značilnosti primarnih celic in vzpostavljene imortalizirane celične linije: viabilnost, podvojitev populacije, migracijo celic, odsotnost senescence, odsotnost mikoplazme v celičnem gojišču, izražanje morfoloških označevalcev in z estrogenom povezanih genov. Poleg tega bomo določili genomsko stabilnost z analizo kariotipa in genetsko pristnost z STR analizo. Z vzpostavitvijo dobro okarakterizirane celične linije pričakujemo, da bomo pridobili močno eksperimentalno orodje za preučevanje endometrioze na celični ravni. Ta novi in vitro model peritonealne endometrioze je lahko potencialno učinkovit za testiranje farmakoloških učinkovin ali odkrivanje biomarkerjev.